co, ooi~6有利于聚合酶的稳定。
5．Taq DNA聚合酶 Taq DNA聚合酶是从一种嗜热水生菌Th erm“saqutlticus YT-I菌株中分离提纯的，分子量94kD，在70 --75℃时具有最高的生物学活性，具有良好的热稳定性。该酶具有5‘一3 7聚合酶活性及5 7—3’外切酶活性，缺乏3’一5 7外切酶活性。因此，在PCR反应中，Taq DNA聚合酶没有引物3 7端错配碱基的校正功能。使用Ta口DNA聚合酶，反应中出现碱基的错配率为2.1×10-4左右。
（三）上海亲子鉴定PCR热循环参数
典型的上海亲子鉴定PCR循环由变性、退火和延伸三步组成。变性是PCR的第一步，能否使模板彻底变性是启动和成功进行PCR的关键。通常，94℃30s即可足以满足各种DNA分子的完全变性。温度过高或高温持续时间过长，可对Taq DNA聚合酶活性和dNTP分子造成损害，
退火温度决定上海亲子鉴定PCR的扩增特异性。退火温度的选择，可以根据引物的长度和其G-I-C含量确定。引物长度介子15～25bp时，可根据公式Tm-4(G+C)+2(A+T)估算退火温度。在Tm允许的范周内，选择较高的退火温度可大大减少引物与模板之间的非特异性结合，提高PCR反应的特异性。通常，退火时间设置为30s，足以保证引物与模板DNA完全结合。
上海亲子鉴定http://www.51gtdna.com/上海亲子鉴定
|
