上海亲子鉴定双脱氧核苷酸链终止法测序反应基本过程
(1)上海亲子鉴定较早的dNTP标记物是32P，如cr32 P-dNTP，具有较高的灵敏度。因为放射性污染的缺陷，后来有的实验室改用非同位素标记如生物素，碱性磷酸酶等。
(2)上海亲子鉴定DNA聚合酶常用有大肠杆菌DNA聚合酶Klenow片段，具有完整的5’一3 7聚合酶活性和3’一5’外切酶活性，可以校正引物3’端错配碱基，提高序列测定的准确性。其他聚合酶还有T7聚合酶、测序酶和Taq DNA聚合酶等。 。
k(3)上海亲子鉴定标准的测序反应设置4个反应管，包括0.5mmol/L dNTP，4管相应的各ddNTP lOmmol/L，反应缓冲液为lOOmmol/L Tris-HCI，pH8.0，lOOmmol/LMgCL2；测序引物2ng/yI;DNA聚合酶Klenow片段50u／弘I;反应过程中的dATP以a_32 P-dATP(lOmCi/ml)形式加入。反应管先在55℃水浴中保温30min，然后缓慢降至室温使模板与引物退火并延伸。
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