上海亲子鉴定双脱氧核苷酸链终止法测序基本技术
双脱氧链终止测序方法有三个步骤:准备DNA测序模板;进行链合成反应即测序反应和通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离片段,显带并读出序列。
1.上海亲子鉴定模板与引物单链DNA和碱变性的双链DNA都可以作为测序模板。常用技术是将靶DNA片段插入噬菌体M13或者质粒载体构建重组DNA,再经过克隆增殖与纯化,获得含靶DNA片段的重组体。然后以靶DNA片段两侧翼的载体已知序列作为测序反应的引物引导测序反应。由于克隆载体的序列是已知的,所以可引导任何靶DNA片段的测序反应,故被称为“通用引物”.
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