将DNA片段固定在尼龙膜上。
(五)上海亲子鉴定探针选择
RFI—P分析所用的探针是小卫星DNA的核心序列串联重复形成的多聚体片段,主要从基因组DNA中筛选,或者参照靶VNTR序列人工合成。根据探针的
特异性,上海亲子鉴定分为单基因座探针和多基因座探针两种。
1.单基因座探针单基因座探针具有基因座特异性,在高强度杂交条件下,形成单个基因座的RFLP图谱,显示出各等位基因的位置,并能依据其片段长度命名等位基因和被鉴定样本的表型。选择单基l斟座探针的标准,一是要求所测基因座多态性程度高,二是探针特异性好,能与靶基因的等位基因片段稳定杂交,重复性好。目前常规使用的单基因座探针都比较稳定,基因座杂合度多在.0.60~0. 99,符合实际案件检测的要求。常用的单基因座探针有pYNH24、pCMMIOI、pL336等(表4-2)。
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