DNA含量成正比。由于EB-DNA复合物中的荧光强度比溶液中游离的EB荧光大10倍左右,被染色的DNA电泳区带很容易鉴别。将电泳后的凝胶直接放入0. 5yl/ml溴乙锭溶液染色30分钟后,在紫外线照射下观察并判定基因型别。也
可以在凝胶中加入0. 5yl/ml浓度的溴乙锭,在电泳的过程中随时监测DNA片段的泳动过程。
前面已强调,溴乙锭是强诱变剂,并有中度毒性,操作中应加强自我保护。现在溴乙锭染色在Amp-FLP分型中已很少应用。
4.基因型判定 Amp-FI。P分析VNTR基因座,等位基因上海亲子鉴定按长度命名,有两种命名方式。一种是直接用片段长度bp命名,在加样电泳分离时,同时加DNA片段长度标准物( molecular marker)o显带后参照分子量标准确定靶基I雨的长度,命名等位基因。另一种方法是按照重复单位的重复次数命名。VNTR基因座等位基因间的实质差异是重复次数,按重复次数命名是目前的标准命名方法。命名参照的标准物是等位基因分型标准物(allelic ladder),由靶基因座所有的等位基因片段混合组成,每一个片段的重复次数是已知的。在上海亲子鉴定同一电泳条件下,等位基因与标准物比对即可确定等位基因和基因型。
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